進行條件性恐懼實驗要注意哪些事項
點擊次數(shù)：836 更新時間：2022-07-20
條件性恐懼實驗系統(tǒng)（也叫場景恐懼系統(tǒng)）用于小型嚙齒類動物（大、小鼠）環(huán)境相關(guān)條件性恐懼實驗研究。嚙齒類動物在恐懼時會表現(xiàn)出*的不動狀態(tài)（Freezing），動物在這種情況下傾向于保持靜止不動的防御姿勢。抗抑郁藥和抗中樞興奮藥可以明顯縮短不動狀態(tài)持續(xù)的時間。實驗過程中，實驗對象被給與一個聲音信號（條件刺激），隨后給予電擊（非條件）刺激。該訓練稱為條件性訓練，訓練結(jié)束后實驗動物進行聲音信號或環(huán)境聯(lián)系性實驗。一般情況下嚙齒類動物對相應(yīng)的環(huán)境和不同環(huán)境下同樣的聲音信號都會做出明顯的條件性恐懼反應(yīng)，如靜止不動。這種測試可以在訓練結(jié)束后立刻或幾天后進行可以提供在條件信號影響下短期和長期記憶的信息。
1.動物對電擊的反應(yīng)部分地取決于非條件刺激的電擊強度和痛苦。當動物(尤其是基因改變的動物，如轉(zhuǎn)基因或基因敲除小鼠)不能學會關(guān)聯(lián)條件反射時，可能是電擊強度不夠或痛苦偏高所致。對條件反應(yīng)程度與電擊強度進行比較分析，可排除對電擊強度因素的疑慮;對刺激電流強度(0.1^0.7mA)與反應(yīng)作一“量-效曲線”，可評價動物的痛苦或?qū)﹄姄舻拿舾行?。此外，格柵地板若沾有動物的排泄物也可改變電刺激強度。因此，?yīng)保持格柵地板的清潔與干燥。
2.由于老年動物聽力減弱甚至喪失，對聽覺暗示可能反應(yīng)遲鈍或無反應(yīng)。此外，有些品系的小鼠，即使在成年早期，對高頻音刺激的反應(yīng)尤其減弱。因此，用這一模型測定.老年動物或某些品系的小鼠時應(yīng)特別謹慎，并避免用高頻音刺激。
3.要使動物在關(guān)聯(lián)測試中表現(xiàn)凝滯行為，必須讓其在操作箱內(nèi)有適當?shù)臅r間。應(yīng)避免將動物放入箱內(nèi)便立即給予電刺激，因為這樣動物沒有時間在電擊與箱內(nèi)環(huán)境(關(guān)聯(lián))之間形成聯(lián)系。
4.觀察者必須快速、準確地判定動物是否表現(xiàn)凝滯行為，而不應(yīng)在整個10s觀察期間死盯著動物，以免動物在這10s間隙活動而導致計分不準。不同觀察者應(yīng)用同一種方法計分，兩名觀察者計分之間的相關(guān)系數(shù)應(yīng)在0.98以上。同樣地，當采用自動計分系統(tǒng)進行計分時，應(yīng)對系統(tǒng)進行調(diào)節(jié)，使之與人工方法計分相比，兩者的相關(guān)系數(shù)在0.98~~1之間。
5.在本實驗中，先測試關(guān)聯(lián)學習，再測試暗示條件反應(yīng)。在關(guān)聯(lián)測試中沒有聽覺暗示刺激，因此,動物在暗示條件測試時對聽覺刺激的反應(yīng)有可能發(fā)生消退(extinction)。理論上，這種聽覺暗示反應(yīng)可能減弱。為消除這種實驗偏差，將其中一半動物先測試聽覺暗示反應(yīng)，一小時后再檢查關(guān)聯(lián)條件反應(yīng)。
6.實驗分兩天進行。訓練和測試應(yīng)在每天的同一時間進行。測試(凝滯計分)所花的時間比訓練要長的多，因此，同--批訓練的動物不宜過多。
7.暗示和關(guān)聯(lián)兩種條件恐懼可表現(xiàn)出發(fā)育差異和基因差異。例如，年齡在18天的大鼠有聽覺條件恐懼，但極少有關(guān)聯(lián)條件恐懼;而到23天時，關(guān)聯(lián)和聽覺暗示條件恐懼都有。有些品系的小鼠(如DBA/2小鼠)只有很弱的關(guān)聯(lián)條件恐懼，但聽覺條件恐懼卻很好。
8.對有些基因型動物，如果預(yù)先讓其短暫適應(yīng)關(guān)聯(lián)條件，關(guān)聯(lián)學習會得到改善。一般認為這與海馬功能增強有關(guān)。這種適應(yīng)通常在訓練前一天進行，而且時間很短(30^60s)。
9.暗示條件恐懼由側(cè)杏仁核調(diào)節(jié)，而關(guān)聯(lián)條件恐懼由杏仁核和海馬共同介導。毀損這些腦區(qū)可削弱或阻斷暗示與關(guān)聯(lián)恐懼條件反射。
