高架十字迷宮是評價嚙齒類動物焦慮反應(yīng)的實(shí)驗方法
點(diǎn)擊次數(shù):883 更新時間:2022-04-26
高架十字迷宮(theelevatedplusmaze,EPM)是評價嚙齒類動物焦慮反應(yīng)的實(shí)驗方法,相較傷害性刺激所致小鼠焦慮行為檢測(如電刺激、噪聲刺激、飲食剝奪和暴露在捕食者氣味等),該實(shí)驗具有操作簡單的優(yōu)點(diǎn),能直觀反映小鼠的條件應(yīng)答。EPM實(shí)驗是在高架Y型迷宮的基礎(chǔ)上發(fā)展而來的。EPM由開臂(openarms和閉臂(closedarms)各兩條組成,呈十字形交叉,交義部分為中央?yún)^(qū),距地面有一定高度。其原理是由于面對新事物開臂小鼠會產(chǎn)生好奇心去探究,而它們有嗜暗的天性(閉臂),兩者之間發(fā)生探究與回避的沖突行為,產(chǎn)生焦慮心理。整個迷宮距離地面的高度相當(dāng)于人類站在懸崖邊,易導(dǎo)致動物產(chǎn)生恐懼不安的心理。可以通過對比小鼠在開臂和閉臂內(nèi)的滯留時間和路程來評價小鼠的焦慮行為。
高架十字迷宮主要由兩條開臂和兩條閉臂組成,互相垂直呈十字交叉,儀器上方裝有動物行為實(shí)驗專用的監(jiān)控攝像機(jī),通過采集卡連接電腦內(nèi)的SuperMaze或VisuTrack動物行為分析軟件。高架十字迷宮實(shí)驗儀器區(qū)分大小鼠,尺寸不一樣。
通常情況下:
1、大鼠臂寬10cm,臂長50cm,閉臂高40cm,迷宮離地高度60-70cm左右;
2、小鼠臂寬5cm,臂長35cm,閉臂高15cm,迷宮離地高度約40-55cm左右;
高架十字迷宮的實(shí)驗步驟:
1、實(shí)驗之前,一定要確保高架十字迷宮整個裝置的清潔。這個步驟不僅僅是要求當(dāng)天的初次實(shí)驗,更加側(cè)重于每一次動物實(shí)驗完成后的清潔除味工作,一定要去除上一只動物在宮體內(nèi)遺留下來的尿液、糞便等,盡可能創(chuàng)造一個清潔、無味道的理想試驗環(huán)境。同時,實(shí)驗員需要記錄動物的編號、日期、狀態(tài)等信息;實(shí)驗動物提前運(yùn)送到行為學(xué)實(shí)驗室專用臨時籠架,
適應(yīng)環(huán)境至少3H左右,減少動物緊張。
2、將實(shí)驗動物(大鼠或者小鼠)從飼養(yǎng)籠中取出,實(shí)驗動物盡量背向?qū)嶒瀱T,將動物輕輕放在儀器宮體的中央?yún)^(qū)域,動物面向開臂,然后實(shí)驗員迅速安靜的離開;
3、打開SuperMaze或者VisuTrack動物行為分析軟件,跟蹤動物在高架十字迷宮儀器內(nèi)的軌跡運(yùn)動,自動計算指標(biāo),通常實(shí)驗時長為5min;
4、實(shí)驗結(jié)束后,取出實(shí)驗動物,放入飼養(yǎng)籠,做好實(shí)驗完成動物的標(biāo)記信息,同時,用酒精和紙巾清潔迷宮。